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TECHNICAL ARTICLESExpiCHO表達(dá)培養(yǎng)基配方中包含GlutaMAX-I™試劑??芍苯邮褂?,無需添加劑?;瘜W(xué)成分明確的配方可實(shí)現(xiàn)高度的重現(xiàn)性和批間可靠性。為了獲得較高水平的瞬時(shí)蛋白表達(dá),該培養(yǎng)基應(yīng)與匹配的培養(yǎng)基補(bǔ)料——ExpiCHO™補(bǔ)料配合使用,后者作為ExpiFectamine™CHO轉(zhuǎn)染試劑盒(貨號(hào)A29129)。不推薦將ExpiCHO表達(dá)培養(yǎng)基用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞通常置于錐形瓶?jī)?nèi),放在搖床平臺(tái)上,然后放入加濕的CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)生長(zhǎng)。但是培養(yǎng)體積可...
我在直接使用DynamisAGT培養(yǎng)基培養(yǎng)CHO細(xì)胞的過程中遇到困難。我該如何處理?請(qǐng)參考如下的逐步適應(yīng)步驟:如果您在切換至某一比例時(shí)培養(yǎng)時(shí)遇到問題,請(qǐng)以前面的比例進(jìn)行傳代2-3次。1.對(duì)培養(yǎng)在含5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基中的CHO細(xì)胞進(jìn)行逐步適應(yīng)培養(yǎng)時(shí),請(qǐng)使用3×10E5–4×10E5活性細(xì)胞/mL的接種密度。2.使用Countess自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀監(jiān)控細(xì)胞生長(zhǎng)情況,直至活性細(xì)胞密度達(dá)到≥1×10E6個(gè)細(xì)胞/mL。3.按照DynamisAGT培養(yǎng)基:原始培養(yǎng)...
我能使用ProBond或Ni-NTA純化系統(tǒng)來純化Expi293表達(dá)培養(yǎng)基中的目的蛋白嗎?Expi293表達(dá)培養(yǎng)基并不直接兼容ProBond或Ni-NTA純化系統(tǒng)。我們推薦在用His標(biāo)簽的純化操作之前進(jìn)行一次緩沖體系交換或樣本透析。我能在Expi293表達(dá)系統(tǒng)中使用另外一種293細(xì)胞系嗎?大多數(shù)293細(xì)胞系均能適應(yīng)從傳統(tǒng)含血清或其它無血清培養(yǎng)基向Expi293表達(dá)培養(yǎng)基中的切換按照手冊(cè)中所描述的直接切換法或序貫切換法來操作,大多數(shù)293細(xì)胞系均能適應(yīng)從傳統(tǒng)含血清或其它無血清培...
DMSO細(xì)胞凍存液注意事項(xiàng):DMSO毒性控制:常溫下毒性高,配制時(shí)需在4℃操作,避免直接接觸細(xì)胞。復(fù)蘇后需離心去除DMSO,減少對(duì)細(xì)胞的持續(xù)損傷。無菌操作:DMSO本身有抑菌作用,但配制過程仍需無菌條件。凍存盒使用:程序降溫盒需恢復(fù)至室溫再使用,異丙醇需每?jī)龃?次更換一次。細(xì)胞狀態(tài):凍存前確保細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,密度≥80%。避免污染,凍存前檢查細(xì)胞形態(tài)及活性。保存時(shí)間:-80℃保存不超過半年,液氮中不超過2年。定期復(fù)蘇檢測(cè)存活率,建議每6個(gè)月驗(yàn)證一次。
GlutaMAX補(bǔ)充劑是L-谷氨酰胺的改良型替代品,以L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽形式存在,具有更高的穩(wěn)定性,可顯著減少細(xì)胞培養(yǎng)中的氨毒性,改善細(xì)胞健康,適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型的長(zhǎng)期和高密度培養(yǎng)。核心優(yōu)勢(shì):穩(wěn)定性強(qiáng)與傳統(tǒng)L-谷氨酰胺易自發(fā)分解產(chǎn)生氨不同,GlutaMAX™通過二肽鍵保護(hù)谷氨酰胺,僅在細(xì)胞需要時(shí)裂解釋放,從而避免氨的積累。在室溫(15-30°C)下可穩(wěn)定保存24個(gè)月,支持長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)規(guī)劃。減少氨毒性氨是細(xì)胞代謝的毒性副產(chǎn)物,會(huì)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、...
通常情況下,胰酶可在冰箱中保存一周。不過,這一時(shí)間長(zhǎng)度也隨著這一周內(nèi)的加熱次數(shù)和使用頻率而變化。同時(shí),它也與細(xì)胞粘附的緊密程度有關(guān),胰酶在非冰凍條件下每天都會(huì)喪失一定的活性。這種胰蛋白酶的液體制劑含有EDTA和酚紅。Gibco胰蛋白酶-EDTA由胰蛋白酶粉末制成,胰蛋白酶粉末是源自豬胰腺的蛋白酶的輻照混合物。由于其消化強(qiáng)度,胰蛋白酶廣泛用于細(xì)胞解離、常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)傳代和原代組織解離。解離所需的胰蛋白酶濃度因細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)要求而異。查看全系列的Gibco胰蛋白酶溶液和推薦的解離條...
無血清培養(yǎng)基是一種不添加動(dòng)物血清(如胎牛血清、馬血清等)的細(xì)胞培養(yǎng)基,通過添加生長(zhǎng)因子、激素、貼壁因子、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等替代血清中的活性成分,以滿足細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和功能表達(dá)的需求。其設(shè)計(jì)旨在克服血清培養(yǎng)基的局限性,廣泛應(yīng)用于生物制藥、細(xì)胞治療、疫苗生產(chǎn)、基礎(chǔ)研究等領(lǐng)域。無血清培養(yǎng)基的優(yōu)勢(shì):減少批次間差異血清成分復(fù)雜且批次間差異大,可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可重復(fù)。無血清培養(yǎng)基成分明確,可顯著提高實(shí)驗(yàn)的一致性和可重復(fù)性。降低污染風(fēng)險(xiǎn)血清可能攜帶病毒、支原體、內(nèi)毒素等污染物,而無血清培養(yǎng)基通過...
三合一微生物單克隆挑選系統(tǒng)/INNOSMART®MONOCLONEINNOSMART®MONOCLONE是一臺(tái)高通量單克隆挑選自動(dòng)化智能設(shè)備,可實(shí)現(xiàn)涂布及挑選等工藝。集成化集成了4通道移液、孔板機(jī)器人、96通道挑頭、無菌泵液等多類型單元超高通量超高通量單克隆挑選,通量30000克隆/天挑頭CIP自動(dòng)CIP功能,保障挑頭的重復(fù)使用及無菌性和無污染,防止核酸級(jí)別交叉污染工藝編輯提供生物工藝常用菌種的相關(guān)工藝參數(shù),縮短用戶工藝摸索時(shí)間層流百級(jí)層流環(huán)控保護(hù),保障實(shí)驗(yàn)安...
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